IPTG CAS:367-93-1 İstehsalçı Qiyməti
İzopropil β-D-1-tioqalaktopiranosid (IPTG) molekulyar biologiya tədqiqatlarında və biotexnologiya tətbiqlərində geniş istifadə olunan laktozanın sintetik analoqudur.IPTG ilk növbədə bakterial sistemlərdə genlərin ifadəsini stimullaşdırmaq üçün istifadə olunur, burada hədəf genlərin transkripsiyasını başlatmaq üçün molekulyar tetik rolunu oynayır.
Böyümə mühitinə əlavə edildikdə, IPTG bakteriyalar tərəfindən qəbul edilir və lak repressor zülalına bağlana bilər və lak operonunun fəaliyyətini maneə törədir.Lak operon laktoza mübadiləsində iştirak edən genlər toplusudur və repressor zülalı çıxarıldıqda, genlər ifadə edilir.
IPTG tez-tez lak promotorunun konstitutiv olaraq aktiv versiyası olan lacUV5 mutant promotoru ilə birlikdə istifadə olunur.Tədqiqatçılar IPTG induksiyasını bu mutant promotorla birləşdirərək yüksək səviyyəli gen ifadəsinə nail ola bilərlər.Bu, təmizlənmə və ya digər aşağı axın tətbiqləri üçün böyük miqdarda protein istehsalına imkan verir.
Gen ifadəsinə əlavə olaraq, IPTG də tez-tez mavi/ağ skrininq analizlərində istifadə olunur.Bu texnikada lacZ geni adətən maraq doğuran genlə birləşir və bu birləşmə genini uğurla ifadə edən bakteriyalar aktiv β-qalaktosidaza fermenti istehsal edəcək.X-gal kimi xromogen substrat ilə birlikdə IPTG əlavə edildikdə, füzyon genini ifadə edən bakteriyalar β-qalaktozidazanın aktivliyinə görə mavi rəngə çevrilir.Bu, maraq doğuran geni uğurla birləşdirmiş rekombinant ştammların müəyyən edilməsinə və seçilməsinə imkan verir.
Gen ifadəsinin induksiyası: IPTG adətən bakterial sistemlərdə hədəf genlərin ifadəsini induksiya etmək üçün istifadə olunur.O, təbii induktor laktoza təqlid edir və lak repressor zülalına bağlanaraq, onun lak operonunu maneə törətməsinə mane olur.Bu, istədiyiniz genlərin transkripsiyasına və ifadəsinə imkan verir.
Protein ifadəsi və təmizlənməsi: IPTG induksiyası tez-tez biokimyəvi tədqiqatlar, terapevtik istehsal və ya struktur analiz kimi müxtəlif məqsədlər üçün böyük miqdarda rekombinant zülal istehsal etmək üçün istifadə olunur.Müvafiq ifadə vektorlarından və IPTG induksiyasından istifadə etməklə tədqiqatçılar bakteriya sahiblərində yüksək səviyyəli hədəf protein istehsalına nail ola bilərlər.
Mavi/ağ skrininq: IPTG tez-tez mavi/ağ skrininq analizləri üçün lacZ geni və X-gal kimi xromogen substrat ilə birlikdə istifadə olunur.LacZ geni adətən maraq doğuran genlə birləşir və bu birləşmə genini uğurla ifadə edən bakteriyalar aktiv β-qalaktosidaza fermenti istehsal edəcəklər.IPTG və xromogen substrat əlavə edildikdə, füzyon genini ifadə edən rekombinant ştammlar mavi rəngə çevrilir və asan identifikasiya və seçilməyə imkan verir.
Gen tənzimlənməsinin öyrənilməsi: IPTG induksiyası, genlərin və operonların, xüsusən də lak operonun tənzimlənməsini öyrənmək üçün tədqiqatlarda geniş istifadə olunur.IPTG konsentrasiyalarını manipulyasiya etməklə və lak operon komponentlərinin ifadəsini izləməklə tədqiqatçılar genlərin tənzimlənməsi mexanizmlərini və müxtəlif amillərin və ya mutasiyaların rolunu araşdıra bilərlər.
Gen ifadə sistemləri: IPTG, T7 promotor əsaslı sistemlər kimi bir neçə gen ifadə sistemində mühüm komponentdir.Bu sistemlərdə lak promotoru tez-tez T7 RNT polimerazanın ifadəsini idarə etmək üçün istifadə olunur ki, bu da öz növbəsində T7 promotor ardıcıllığının nəzarəti altında hədəf genləri transkripsiya edir.IPTG, T7 RNT polimerazının ifadəsini stimullaşdırmaq üçün istifadə olunur və hədəf gen ifadəsinin aktivləşməsinə səbəb olur.
Tərkibi | C9H18O5S |
Təhlil | 99% |
Görünüş | Ağ toz |
CAS nömrəsi | 367-93-1 |
Qablaşdırma | Kiçik və toplu |
Raf Ömrü | 2 il |
Saxlama | Sərin və quru yerdə saxlayın |
Sertifikatlaşdırma | ISO. |